Lablog2-13：ニトロセルロース親和性ペプチドの獲得を目指した融合タンパク質の設計と評価

Date: 2023-03-04

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ニトロセルロース親和性ペプチドの獲得を目指した 融合タンパク質の設計と評価 Design and characterization of fusion proteins for identification of nitrocel…

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Questions and answers

Q1：抗原結合活性の結果で、シグナルの定量評価していないのですか？
A1：抗原結合活性の定量化は行っておらず、シグナルが増加したという結果のみで判断しました。
理想A1:こちらの抗原結合活性では、定量評価を行っていないのですが、イムノクロマトグラフィでscFvにLFを標識することで、約280倍低感度の抗原を検出できたという結果が得られています。
Q2：ラクトフェリンのNC膜への吸着メカニズムはわかっていますか？
A2：メカニズムはわかっていませんが、スポット径が小さいため、NC膜に強く吸着していると判断し、次の検討に進みました。
理想A2：NC膜の表面の状況によって、タンパク質の吸着メカニズムが変わってくると考えられますが、NC膜の表面の修飾などがわかっていないため、メカニズムはわかっておりません。
Q3：なぜ2%のCHAPSを用いて検討を行ったのですか？
A3：2%,0.2%と濃度を振った時に、0.2%において差が出た為、0.2%で比較を行いました。
理想A3：固定化時に常に2%のCHAPS共存下で行わないといけないのではなく、NC膜は生体分子に対する吸着性が極めて高いため、scFvが吸着しにくい条件を探索する際に、CHAPS共存下で検討されたため、市販のタンパク質でも同じ条件でNC膜に吸着するタンパク質の探索を行いました。